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Tris-Acetate电泳凝胶制备试剂盒 通用

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试剂盒组成


  • 缓冲液:通常包含 Tris - Acetate 缓冲体系,为凝胶提供稳定的 pH 环境和离子强度,保证核酸或蛋白质在电泳过程中的稳定性和迁移率。还可能含有 EDTA,用于螯合金属离子,防止核酸酶对核酸的降解。

  • 凝胶基质:如聚丙烯酰胺或琼脂糖。聚丙烯酰胺凝胶分辨率高,适用于分离较小的核酸片段或蛋白质;琼脂糖凝胶孔径较大,常用于分离较大的核酸片段。

  • 交联剂:如甲叉双丙烯酰胺,用于与凝胶基质发生交联反应,形成三维网状结构的凝胶,使核酸或蛋白质在其中依据大小、电荷等因素进行分离。

  • 引发剂和加速剂:例如过硫酸铵和四甲基乙二胺(TEMED),过硫酸铵产生自由基引发丙烯酰胺的聚合反应,TEMED 加速这一反应过程,使凝胶能够在较短时间内凝固成型。

  • 其他成分:可能包括染色剂,如溴酚蓝、二甲苯青等,用于指示电泳的进程;以及一些添加剂,用于改善凝胶的性能,如提高凝胶的透明度、稳定性等。

工作原理


  • 以聚丙烯酰胺凝胶为例,在引发剂和加速剂的作用下,丙烯酰胺单体发生自由基聚合反应,形成线性的聚丙烯酰胺链。同时,交联剂甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺链发生交联反应,使聚丙烯酰胺链相互连接,形成具有一定孔径大小的三维网状结构的凝胶。在电泳过程中,核酸或蛋白质分子在电场作用下进入凝胶的网状结构,由于不同大小和形状的分子在凝胶中的迁移速度不同,从而实现分离。


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